Ниска доза подкожно или интравенозно моноклонално антитяло за предотвратяване на малария

Дизайн на изпитанието и участници

VRC 614 е фаза 1, отворено клинично изпитване с повишаване на дозата. Основните цели на изпитването бяха да се оцени безопасността и профилът на страничните ефекти на L9LS, прилаган при интравенозни дози от 1, 5 и 20 mg на килограм телесно тегло и при подкожна доза от 5 mg на килограм. Вторичните цели бяха да се оценят фармакокинетичните свойства и защитната ефикасност на L9LS след контролирана инфекция с малария при хора приблизително 2 до 6 седмици след като участниците са получили L9LS.

Допустимите участници бяха здрави възрастни на възраст от 18 до 50 години, които преди това не са имали малария или са получили ваксина срещу малария. Пълните подробности за критериите за включване и изключване са предоставени в протокола, достъпен с пълния текст на тази статия на NEJM.org.

Надзор на процеса

Изпитването е проектирано, финансирано и проведено от Центъра за изследване на ваксините, Националния институт по алергии и инфекциозни болести, Националния институт по здравеопазване (NIH), в клиничния център на NIH в Бетесда, Мериленд. Контролираната инфекция с малария при хора беше проведена в съоръжението на американската армия в Армейския изследователски институт Уолтър Рийд в Силвър Спринг, Мериленд. Институционалният съвет за преглед на NIH одобри протокола от клиничното изпитване. Всички участници предоставиха писмено информирано съгласие и изпитването следваше насоките на Министерството на здравеопазването и човешките услуги за защита на участниците в изследванията върху хора. Данните бяха събрани и анализирани от Центъра за изследване на ваксините и Армейския изследователски институт Уолтър Рийд. Всички автори гарантират за точността и пълнотата на данните и анализите и за спазването на протокола на изпитването.

Пробен продукт

L9LS, човешко IgG1 моноклонално антитяло, което е произведено в съответствие с настоящите добри производствени практики чрез експресия в клетъчна култура в рекомбинантна клетъчна линия от яйчник на китайски хамстер, се състои от пречистен, формулиран L9LS гликопротеин. Процесите и аналитичните методи бяха разработени в Програмата за производство на ваксини на Изследователския център за ваксини и прехвърлени към Програмата за клинични материали за ваксини, управлявана по договор с Leidos Biomedical Research във Фредерик, Мериленд, за настоящи добри производствени практики за производство и флакони в буферирана формулировка при концентрация от 150 mg на милилитър.

Съдебни процедури

L9LS се прилага интравенозно за период от 30 минути в доза от 1 mg на килограм телесно тегло, 5 mg на килограм или 20 mg на килограм. Участниците, които са получили подкожни инжекции, са получили 5 mg на килограм, като общата доза е разделена на една или две инжекции, не превишаващи 2,0 ml всяка, според теглото на участника. Повечето инжекции са коремни, но горната част на ръката може да се използва, ако се предпочита от участника и клинициста. Участниците бяха наблюдавани в клиниката в продължение на 1 до 2 часа след прилагане на L9LS.

Проведени са междинни прегледи на данните за безопасност, за да се оценят каквито и да било опасения за безопасността, свързани с дозата, преди повишаване на дози от 5 mg на килограм и 20 mg на килограм. Нежеланите нежелани събития са записани в продължение на 28 дни след прилагане на L9LS и контролирана маларийна инфекция при хора и са класифицирани според модифицирана таблица за синдром на придобита имунна недостатъчност за степенуване на тежестта на нежеланите събития при възрастни и деца.14 Сериозни неблагоприятни събития и нови хронични медицински състояния бяха записани за цялата продължителност на изпитването.

Участниците са проследени в продължение на 24 седмици след приложението на L9LS. Контролните участници бяха проследени в продължение на 7 седмици след контролирана инфекция с малария при хора.

Контролирана маларийна инфекция при хора

Участниците бяха изложени на ухапвания по предмишницата от Anopheles stephensi комари, заразени с P. falciparum (3D7 щам). Участниците отговарят на стандартни критерии за инфекциозност, състоящи се от пет квалифициращи ухапвания от комари с оценка на слюнчените жлези 2 или повече (резултатите варират от 0 до 4, като по-високите резултати показват повече микроскопски наблюдавани спорозоити).15 Участниците бяха оценени чрез две телефонни обаждания през първите 7 дни след контролирана инфекция с малария при хора, последвани от посещения в клиниката на дни 7 до 17 и на ден 21 за оценка за паразитемия с високочувствителна и специфична полимеразна верига. реакция (PCR) тест за откриване на маларийна инфекция в ранен кръвен стадий.15-17 Ден 21 беше избран като горен край на диапазона от дни за оценка, за да се сведе до минимум рискът от излагане на коронавирусна болест 2019, като същевременно се осигури достатъчно време за оценка за паразитемия.

Паразитемията се определя като единичен положителен PCR резултат. Участниците се считат за защитени, ако паразитемията не се развие до ден 21 след контролирана инфекция с малария при хора. Директно наблюдавана терапия със стандартно лечение от 1 g атовакуон и 400 mg прогуанил хидрохлорид в продължение на 3 последователни дни е започнала при всички участници или при потвърждаване на паразитемия, или на 21-ия ден, ако участникът вече не е бил лекуван.

Фармакокинетика

Серумните концентрации на L9LS бяха количествено определени с използването на L9LS анти-идиотипно антитяло на платформата Meso Scale Discovery, както беше описано по-горе, в предварително определени времеви точки до 8 седмици след прилагане на моноклоналното антитяло.3 Фармакокинетичният анализ на концентрациите на L9LS беше извършен както с компартментален, така и с некомпартиментен подход. Описателна статистика за максималната серумна концентрация (Cмакс) и за времето на максимална концентрация (Тмакс), заедно с концентрациите в пробните дни 28 и 56, бяха изчислени въз основа на наблюдаваните данни. Площта под кривата се изчислява по метода на линейния трапец. Допълнителни подробности за метода за количествено определяне и фармакокинетичния анализ са описани в раздела Допълнителни методи в Допълнителното приложение, достъпно на NEJM.org.

Статистически анализ

Целевият размер на извадката беше определен въз основа на вероятността за наблюдаване на сериозни нежелани събития. Анализът на ефикасността включва всички включени участници, които са претърпели контролирана инфекция с малария при хора. Първичният анализ на ефикасността беше извършен с помощта на двустранен тест на Barnard, при който процентът на участниците, които са имали маларийна инфекция сред тези, които са получили L9LS, беше сравнен с процента сред контролните участници. Вторичният анализ на ефикасността се основава на времето до паразитемия; Кривите на Каплан-Майер бяха предоставени за всяка група и сравнени с използването на логаритмичен тест. За да се оцени сравнимостта на предизвикателството между лекуваните и контролните групи, средните и интерквартилните диапазони на резултатите на слюнчените жлези бяха докладвани за всяка група. Поради проучвателния характер на изпитването не беше направена корекция за множественост.